ช่องทางรับฟังความคิดเห็น     คลังเอกสาร     คำถามที่พบบ่อย     ถาม-ตอบ      มหาวิทยาลัยอุบลราชธานี    

เครื่องขยายปริมาณสารพันธุกรรมชนิดปฏิกิริยาจริงอัตโนมัติ (Real Time PCR)

เครื่องตรวจวัดทางเคมีไฟฟ้า

(Potentiostat/Galvanostat/Impedance)

รายละเอียด/หลักการ

PCR เป็นวิธีเพิ่มจำนวน DNA วิธีแรก คิดค้นขึ้นในปี 1985 โดย PCR สามารถขยาย DNA sequence ได้มาก โดยวิธี PCR แบ่งเป็น 3 ขั้นตอน คือ Denature โดยใช้อุณหภูมิสูง (94 ํC) เพื่อทำให้ target DNA เส้นเดี่ยวเพื่อจะได้เป็นแม่แบบของการสร้าง DNA จากนั้นลดอุณหภูมิลงเพื่อให้ primer เข้าไปจับกับ DNA ที่เป็นคู่สม (annealing) ... ซึ่งการจับกันของ primer กับ target DNA จะมีความจำเพาะมาก ถ้าใช้อุณหภูมิที่เหมาะสม ( 55-60 ํC) จากนั้นเพิ่ม อุณหภูมิไปที่ 72 ํC ซึ่งเปนอุณหภูมิที่เอนไซม์ DNA Polymerase (Taq DNA Polymerase) สามารถต่อปลาย primer โดยใช้ DNA target เป็นแม่แบบ (Extension) ทำการเปลี่ยนอุณหภูมิดังกล่าวประมาณ 30 -35 รอบ จะได้ DNA เพิ่มขึ้นอย่างน้อย 109 เท่า DNA ที่ขยายเพิ่มขึ้นสามารถที่จะตรวจวิเคราะห์ได้หลายวิธี เช่น ย้อมด้วยสี Ethidium bromide หลังจากการทำ Gel Electrophoresis เป็นต้น การใช้ Real Time PCR เพื่อตรวจสอบผลในขณะที่มีการเพิ่มจำนวน DNA โดยใช้หลักของ fluorescence และprobe หรือการใช้สี SYBR ซึ่งเข้าไปแทรกตัวอยู่ใน DNA เส้นคู่และสามารถเรืองแสงได้

ตัวอย่างการประยุกต์ใช้: 

  • สารอณูชีวโมเลกุล

ผู้รับผิดชอบ

1) นางสาวคัทลียา ยุรยารต์

 

ติดต่อใช้เครื่องมือ